100 καθαρή ασταξανθίνηβρίσκεται σε θαλάσσιους οργανισμούς όπως τα μικροφύκη (Haematococcus pluvialis), ο σολομός, η πέστροφα, το κριλ και οι γαρίδες. Η αύξηση της δημοτικότητάς της μέσα στις βιομηχανίες Nutraceutical, καλλυντικών, υδατοκαλλιέργειας και τροφίμων και ποτών καθοδηγείται από εκτεταμένες έρευνες που υπογραμμίζουν τα οφέλη της, τα οποία ξεπερνούν τα πολλά άλλα αντιοξειδωτικά όπως η βιταμίνη Ε και {{1} καροτένιο. Αυτά τα οφέλη περιλαμβάνουν την καταπολέμηση του οξειδωτικού στρες, τη μείωση της φλεγμονής, την ενίσχυση της υγείας του δέρματος, την ενίσχυση της αντοχής και την υποστήριξη της υγείας των ματιών. Ωστόσο, η αποτελεσματικότητα, η ασφάλεια και η αγοραία αξία των προϊόντων χύδην ασταξανθίνης συνδέονται εγγενώς με την ποιότητα, την καθαρότητα και τη συγκέντρωσή τους. Αλλά πώς να δοκιμάσετε την ασταξανθίνη;

Η σημασία της δοκιμής ασταξανθίνης

Η παγκόσμια αγορά ασταξανθίνης επεκτείνεται ταχέως, προβλέπεται να φτάσει σε δισεκατομμύρια δολάρια τα επόμενα χρόνια. Αυτή η ανάπτυξη συνοδεύεται από μια ποικιλία από 100 καθαρά προϊόντα ασταξανθίνης: συνθετικά έναντι φυσικού, πετρελαίου - εναιωρήματα, εκχυλίσματα σε σκόνη, softgels και τοπικές κρέμες. Αυτή η ποικιλομορφία παρουσιάζει σημαντικές προκλήσεις:

• Επαλήθευση ισχύος:

Το προϊόν παρέχει τη διαφημιζόμενη δόση της ασταξανθίνης;

• Αξιολόγηση καθαρότητας:

Είναι η φυσική ασταξανθίνη απαλλαγμένη από επιβλαβείς διαλύτες, βαριά μέταλλα, φυτοφάρμακα και μικροβιακές μολυσματικές ουσίες;

• Ταυτοποίηση στερεοϊσομερούς:

Η φυσική ασταξανθίνη από το Haematococcus pluvialis είναι σχεδόν αποκλειστικά στην πιο βιοδιαθέσιμες 3S, την εναντιομερική μορφή του 3. Η συνθετική ασταξανθίνη, που παράγεται από πετροχημικά, είναι ένα μείγμα τριών στερεοϊσομερών (3s, 3, 3R, 3 και 3R, 3'R) και γενικά θεωρείται ότι έχει χαμηλότερη βιολογική δραστηριότητα. Η διάκριση μεταξύ τους είναι ζωτικής σημασίας.

• Παρακολούθηση σταθερότητας:

100 Η καθαρή ασταξανθίνη είναι ιδιαίτερα ευαίσθητη στην υποβάθμιση από το οξυγόνο, το φως και τη θερμότητα. Η δοκιμή εξασφαλίζει ότι το προϊόν παραμένει ισχυρό καθ 'όλη τη διάρκεια ζωής του.

• Αυθεντικότητα και νοθεία:

Κάτω - Κόστος συνθετική ασταξανθίνη ή άλλες χρωστικές μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να νοθευτεί τα ακριβότερα φυσικά προϊόντα. Απαιτούνται εκλεπτυσμένες δοκιμές για την ανίχνευση αυτής της απάτης.

Ως εκ τούτου, ένα πρωτόκολλο δοκιμής Multi - FaceTed είναι απαραίτητο για 100 καθαρούς κατασκευαστές, προμηθευτές και χρήστες - για να εγγυηθούν ότι συνεργάζονται με ένα γνήσιο, ισχυρό και ασφαλές προϊόν. Προμηθευτές όπως η Guanjie Biotech, ως εξειδικευμένος κατασκευαστής χύδην ασταξανθίνης, εφαρμόζουν αυτά τα πρωτόκολλα δοκιμών σε κάθε στάδιο, από την ακατέργαστη βιομάζα έως το τελικό εκχύλισμα, για να εξασφαλίσουν την ακεραιότητα του προϊόντος.

Πώς ναΔοκιμή Ασταξανθίνη?

Φασματοφωτομετρία

• Αρχή:

Πρόκειται για μια κλασική, γρήγορη και κόστος - αποτελεσματική μέθοδο που βασίζεται στην απορρόφηση του φωτός σε συγκεκριμένα μήκη κύματος . 100 καθαρή ασταξανθίνη έχει μια χαρακτηριστική μέγιστη απορρόφηση σε διάφορους διαλύτες (π.χ. ~ 470-480 nm σε ακετόνη, χλωροφόρμιο ή αιθανόλη).

• Μέθοδος:

Το 100 καθαρό δείγμα ασταξανθίνης διαλύεται σε κατάλληλο διαλύτη και η απορρόφηση μετράται χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτόμετρο VIS -. Η συγκέντρωση υπολογίζεται χρησιμοποιώντας τη μπύρα - Lambert Law (A=εcc), βασιζόμενη σε προκαθορισμένο συντελεστή μοριακής εξαφάνισης για ασταξανθίνη (π.χ._1%^1CM≈ 2100 σε αιθανόλη στα ~ 480 nm).

• Εφαρμογή:

Το καλύτερο κατάλληλο για γρήγορες, ακατέργαστες εκτιμήσεις της συνολικής περιεκτικότητας σε καροτενοειδή σε ακατέργαστη βιομάζα, πάστα φυκών ή συμπυκνωμένα έλαια. Χρησιμοποιείται ευρέως στο - σπίτι για παρακολούθηση της διαδικασίας.

• Περιορισμοί:

Δεν έχει εξειδίκευση. Μετράει τα συνολικά χρωμοφόρα (έγχρωμες ενώσεις) και δεν μπορεί να διακρίνει μεταξύ της ασταξανθίνης, των εστέρων της, άλλων καροτενοειδών (όπως το καροτένιο) ή τα προϊόντα αποικοδόμησης. Δεν είναι αποδεκτό για την πιστοποίηση τελικού προϊόντος όπου απαιτείται ακριβής ποσοτικοποίηση.

Υψηλή - υγρή χρωματογραφία απόδοσης (HPLC)

Το HPLC είναι η αδιαμφισβήτητη μέθοδος επιλογής για ακριβή αναγνώριση, διαχωρισμό και ποσοτικοποίηση 100 καθαρών ασταξανθίνης και τις διάφορες μορφές της.

• Αρχή:

Το HPLC διαχωρίζει το σύμπλοκο μίγμα ενώσεων σε ένα δείγμα που βασίζεται στο διαφορικό διαχωρισμό μεταξύ μιας σταθερής φάσης (στήλης) και μιας κινητής φάσης (διαλύτης). Στη συνέχεια, οι διαχωρισμένες ενώσεις ανιχνεύονται και ποσοτικοποιούνται, τυπικά χρησιμοποιώντας ανιχνευτή συστοιχίας φωτοδιόδων (PDA).

• Βασικές διαμορφώσεις HPLC για ασταξανθίνη:

Reversed - φάση HPLC (RP - HPLC): Αυτή είναι η πιο κοινή ρύθμιση. Χρησιμοποιούνται μια πολική στατική φάση (π.χ. στήλη C18) και μια πολική κινητή φάση (π.χ. μεθανόλη, ακετονιτρίλιο, νερό, συχνά με τροποποιητές όπως οξικό αιθυλεστέρα ή διχλωρομεθάνιο). Διαχωρίζει εξαιρετικά την ασταξανθίνη από τους εστέρες του (οι μονοεπεξεργαστές εξελίσσονται πριν από τους Diesters) και από άλλα καροτενοειδή.

• Chiral HPLC:

Αυτή η εξειδικευμένη τεχνική χρησιμοποιεί μια χειρόμορφη στατική φάση που έχει σχεδιαστεί για να διαχωρίζει τα εναντιομερή. Είναι η οριστική μέθοδος για τη διάκριση των φυσικών (3s, 3) 100 καθαρής ασταξανθίνης από το συνθετικό μίγμα (3S, 3, 3R, 3, 3R, 3'R). Αυτή είναι μια κρίσιμη δοκιμή για την αυθεντικότητα.

• Ανίχνευση:

Ο ανιχνευτής PDA είναι ζωτικής σημασίας, καθώς παρέχει το φάσμα UV - Vis κάθε κορυφής που εκλούεται από τη στήλη. Αυτό το φασματικό δακτυλικό αποτύπωμα επιτρέπει τη θετική ταυτοποίηση, συγκρίνοντας το φάσμα και το χρόνο συγκράτησης σε ένα αυθεντικό πρότυπο ασταξανθίνης.

• Ποσοτικοποίηση:

Η ποσοτικοποίηση επιτυγχάνεται με την ενσωμάτωση των περιοχών αιχμής του δείγματος και συγκρίνοντάς τις με μια καμπύλη βαθμονόμησης που κατασκευάστηκε από πιστοποιημένα 100 πρότυπα αναφοράς καθαρού ασταξανθίνης της γνωστής συγκέντρωσης. Αυτό επιτρέπει την ακριβή μέτρηση της ελεύθερης ασταξανθίνης, των μονοεστέρας και των diesters μεμονωμένα.

Μια τυπική μέθοδος HPLC - PDA για εστέρες ασταξανθίνης μπορεί να χρησιμοποιήσει:

Στήλη: C18, 250 x 4,6 mm, 5 μm

Κινητή φάση: κλίση του διαλύτη Α (μεθανόλη: νερό, 90:10) και διαλύτης Β (οξικό αιθυλεστέρα) ή ισοκρατικές μέθοδοι με τριμερούς διαλύτες.

Ρύθμιση ροής: 1,0 ml/λεπτό

Ανίχνευση: 470 nm

Θερμοκρασία: 25 μοίρες

• Προετοιμασία δείγματος:

Η εκχύλιση είναι ένα κρίσιμο βήμα - στο HPLC. Τα έλαια μπορούν να αραιωθούν απευθείας σε κατάλληλο διαλύτη. Η αποξηραμένη βιομάζα ή οι σκόνες απαιτούν μια πιο αυστηρή διαδικασία εκχύλισης, συχνά χρησιμοποιώντας διαλύτες όπως ακετόνη, οξικό αιθυλεστέρα ή τετραϋδροφουράνιο (THF) με σφαιρίδια - ξυλοδαρμό ή υπερήχους για να σπάσουν τα τοιχώματα των κυττάρων και να εξασφαλίσουν πλήρη εκχύλιση.

Φασματομετρία μάζας (LC - ms/ms)

• Αρχή:

Η σύζευξη HPLC σε ένα φασματόμετρο μάζας (LC - MS ή LC - ms/ms) προσθέτει ένα απαράμιλλο στρώμα εξειδίκευσης και επιβεβαίωσης. Ο ανιχνευτής MS προσδιορίζει τις ενώσεις με βάση τη μάζα τους - έως - αναλογία φόρτισης (m/z).

• Εφαρμογή:

Επιβεβαιωτική ταυτοποίηση: Παρέχει οριστική επιβεβαίωση μοριακού βάρους . 100 καθαρή ασταξανθίνη έχει μοριακό βάρος 596,8 g/mol. Οι εστέρες του θα παρουσιάζουν αντίστοιχα υψηλότερες μάζες (π.χ. μονοεστέρα με λιπαρό οξύ του MW 282 θα έχουν μάζα 596.8 + 282 - 18=860.8, που αντιπροσωπεύουν την απώλεια νερού κατά τη διάρκεια της εστεροποίησης).

• Ανίχνευση ακαθαρσιών ιχνοστοιχείων:

Εξαιρετικά αποτελεσματική για τον εντοπισμό και την ποσοτικοποίηση χαμηλών επιπέδων άλλων καροτενοειδών, προϊόντων αποικοδόμησης ή μολυσματικών ουσιών που μπορεί να χάσει ένας ανιχνευτής PDA.

• Μελέτες μεταβολικής:

Χρησιμοποιείται στην έρευνα για την παρακολούθηση της ασταξανθίνης και των μεταβολιτών της σε βιολογικά δείγματα (αίμα, ιστούς) για να μελετήσει την απορρόφηση, τη διανομή και τη βιοδιαθεσιμότητα.

Δοκιμές για μολυσματικές ουσίες και καθαρότητα

• υπολειμματικοί διαλύτες:

Η αέρια χρωματογραφία (GC) με ανιχνευτή ιονισμού φλόγας (FID) ή φασματόμετρο μάζας (MS) χρησιμοποιείται για την ανίχνευση και την ποσοτικοποίηση των πτητικών οργανικών διαλυτών (π.χ. εξάνιο, αιθανόλη, οξικό αιθυλεστέρα) που απομακρύνεται από τη διαδικασία εκχύλισης, εξασφαλίζοντας ότι είναι κάτω από τα όρια ασφαλείας που καθορίζονται από φαρμακοποιίες (EG, USP, USP<467>).

• Βαριά μέταλλα:

Επαγωγικά συζευγμένη φασματομετρία μάζας πλάσματος (ICP - ms) ή φασματοσκοπία ατομικής απορρόφησης (AAS) χρησιμοποιούνται για να δοκιμαστούν για τοξικά μέταλλα όπως μόλυβδο, αρσενικό, κάδμιο και υδράργυρο. Τα όρια είναι αυστηρά, συχνά ακολουθούν το USP<232>/ ICH Q3D Κατευθυντήριες γραμμές.

• Μικροβιολογικές δοκιμές:

Χρησιμοποιούνται μέθοδοι μέτρησης των τυποποιημένων πλακών για να εξασφαλιστεί ότι το 100 καθαρό προϊόν ασταξανθίνης βρίσκεται εντός ασφαλών ορίων για ολική αερόβια μικροβιακή μέτρηση, ολική ζύμη και μούχλα και απουσία ειδικών παθογόνων όπως Ε. Coli, Salmonella και Staphylococcus aureus.

• φυτοφάρμακα:

GC - MS ή LC - ms/ms χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση εκατοντάδων πιθανών υπολειμμάτων φυτοφαρμάκων, ιδιαίτερα σημαντικά για τη βιομάζα των φυκών που καλλιεργούνται σε ανοικτές λίμνες.

Δοκιμή σταθερότητας

Η σταθερότητα αξιολογείται χρησιμοποιώντας πρωτόκολλα επιτάχυνσης δοκιμών ανά κατευθυντήριες γραμμές ICH (Q1A (R2)). Τα δείγματα αποθηκεύονται σε θαλάμους σταθερότητας υπό υπογραμμισμένες συνθήκες:

• αυξημένη θερμοκρασία: π.χ. 40 μοίρες ± 2 μοίρες

• Υψηλή υγρασία: π.χ., 75% ± 5% RH

• Έκθεση φωτός: Σύμφωνα με το ICH Q1B

100 δείγματα καθαρού ασταξανθίνης τραβήχτηκαν σε καθορισμένα διαστήματα (0, 1, 2, 3, 6 μήνες) και δοκιμάζονται κυρίως μέσω HPLC για περιεκτικότητα σε ασταξανθίνη. Ο ρυθμός υποβάθμισης αναλύεται για να προβλέψει τη διάρκεια ζωής του προϊόντος υπό συνιστώμενες συνθήκες αποθήκευσης. Αυτό βοηθά επίσης στη διαμόρφωση σταθερών προϊόντων με κατάλληλα αντιοξειδωτικά (π.χ. βιταμίνη Ε) και συσκευασία (αδιαφανή, αεροστεγή δοχεία).

Σύναψη

Τα αξιοσημείωτα οφέλη για την υγεία από 100 καθαρή ασταξανθίνη το ώθησαν στο προσκήνιο των βιομηχανιών διατροφής και λειτουργικών τροφίμων. Ωστόσο, αυτή η υπόσχεση μπορεί να εκπληρωθεί μόνο εάν το προϊόν είναι γνήσιο, ισχυρό, καθαρό και σταθερό. Επομένως, η δοκιμή της ασταξανθίνης μεταβαίνει από μια απλή τεχνική διαδικασία σε έναν θεμελιώδη πυλώνα της ακεραιότητας των προϊόντων και της εμπιστοσύνης των καταναλωτών.

Ενώ η απλή φασματοφωτομετρία έχει τη θέση της για ταχείς ελέγχους, το HPLC - PDA είναι ο απαραίτητος οίκος εργασίας για ακριβή ποσοτικοποίηση και αναγνώριση. Chiral HPLC και LC - MS/MS Παρέχουν την οριστική απόδειξη που απαιτείται για την εξακρίβωση της φυσικής ασταξανθίνης και την ανίχνευση της πολυπλοκότητας. Επιπλέον, ένα ολοκληρωμένο σχήμα ελέγχου ποιότητας πρέπει να περιλαμβάνει δοκιμές για μολυσματικές ουσίες όπως βαρέα μέταλλα, διαλύτες και μικρόβια.

Η εκτεταμένη έρευνα για 100 καθαρή ασταξανθίνη όχι μόνο επιβεβαιώνει τη βιολογική ανωτερότητά της, αλλά παρέχει επίσης την επιστημονική βάση για αυτές τις εξελιγμένες αναλυτικές τεχνικές. Τελικά, η ευθύνη για την εφαρμογή αυτής της αυστηρής δοκιμής μειώνεται στους προμηθευτές. Ένας αξιόπιστος 100 καθαρός προμηθευτής ασταξανθίνης δεν είναι απλώς έμπορος. Είναι ένας φυσικός κατασκευαστής ασταξανθίνης που ενσωματώνει αυστηρές δοκιμές σε ολόκληρο τον αγωγό παραγωγής του. Ο Guanjie Biotech είναι προμηθευτής ασταξανθίνης. Η διαδικασία μας ενσωματώνει αυστηρές δοκιμές σε κάθε στάδιο: από την καλλιέργεια των καθαρών στελεχών Haematococcus pluvialis σε - παρακολούθηση της διαδικασίας και τελική εξαγωγή. Κάθε παρτίδα τελικού προϊόντος χύδην ασταξανθίνης υφίσταται πλήρη μπαταρία αναλύσεων, συμπεριλαμβανομένου του HPLC - PDA για ισχύ, GC για διαλύτες, ICP - MS για βαριά μέταλλα και μικροβιολογικές προσδιορισμούς. Αυτή η δέσμευση, που τεκμηριώνεται σε λεπτομερές πιστοποιητικό ανάλυσης (COA), εγγυάται στους πελάτες ένα προϊόν που είναι ισχυρό, αυθεντικό, ασφαλές και σταθερό.

Αναφορές

[1] Capelli, Β., Bagshaw, J., & Cysewski, GR (2013). Συνθετική έναντι φυσικής ασταξανθίνης: ανασκόπηση της βιοδιαθεσιμότητας και της αποτελεσματικότητας. Cyanotech Corporation.

[2] Fassett, RG, & Coombes, JS (2011). Astaxanthin: Ένας πιθανός θεραπευτικός παράγοντας σε καρδιαγγειακές παθήσεις. Θαλάσσια φάρμακα, 9 (3), 447-465.

[3] Hosseini, SM, Hashemi Gahruie, Η., Razmjooie, Μ., Et αϊ. (2020). Η επίδραση των συνθηκών αποθήκευσης στη σταθερότητα των νανολιποσωμάτων της ασταξανθίνης. Journal of Food Science and Technology, 57 (4), 1425-1434.

[4] Διεθνές συνέδριο για την εναρμόνιση (ICH). (2003). Δοκιμή σταθερότητας νέων ουσιών και προϊόντων φαρμάκων (Q1A (R2)).

[5] Διεθνές συνέδριο για την εναρμόνιση (ICH). (2005). Αμφισβητεία: κατευθυντήρια γραμμή για υπολειμματικούς διαλύτες (Q3C (R6)).

[6] Nishida, Υ., Yamashita, Ε., & Miki, W. (2007). Δραστηριότητες σβέσης κοινών υδρόφιλων και λιποφιλικών αντιοξειδωτικών έναντι του οξυγόνου με τη χρήση συστήματος ανίχνευσης χημειοφωταύγειας. Carotenoid Science, 11, 16-20.

[7] Turcato, Α., Gianoncelli, Α., & Ribaudo, G. (2022). Αναλυτικές στρατηγικές για την αξιολόγηση της ασταξανθίνης και των παραγώγων της σε εμπορικά προϊόντα. Μόρια, 27 (15), 4794.

[8] Οι Ηνωμένες Πολιτείες Pharmacopeia (USP). (2022).<467>Υπολειμματικοί διαλύτες. Φαρμακοποιική Σύμβαση των Ηνωμένων Πολιτειών.

[9] Οι Ηνωμένες Πολιτείες Pharmacopeia (USP). (2022).<232>Στοιχειώδεις ακαθαρσίες - όρια. Φαρμακοποιική Σύμβαση των Ηνωμένων Πολιτειών.

[10] Yuan, JP, Peng, J., Yin, Κ., & Wang, JH (2011). Πιθανή υγεία - Προώθηση των αποτελεσμάτων της ασταξανθίνης: ένα υψηλό - καροτενοειδών αξίας κυρίως από μικροφύκη. Molecular Nutrition & Food Research, 55 (1), 150-165.